Xác định quercetin dạng tự do trong dịch chiết nụ hoa của cây hòe (Sophora japonica L.) bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao
Bài báo đã thiết lập được kĩ thuật tách, định tính trực tiếp quercetin dạng tự do (aglycon) trong dịch chiết methanol nụ hoa hòe bằng phương pháp HPLC đơn giản, dễ thực hiện. Nghiên cứu thực nghiệm trên hệ thống HPLCAgilent1260 Infinity với cột pha đảo ZORBAXSB-C18 (nhiệt độ 25oC), tốc độ dòng 0,5 ml/phút, áp suất trung bình 30-35 bar và đầu dò dãy diot quang (DAD) chúng tôi đã lựa chọn được bước sóng λ = 370nm, thể tích tiêm mẫu 20µl, thời gian phân tích 16 phút với hệ pha động (% thể tích)gồm methanol (15%), acetonitril (20%) và hỗn hợp C (65%, pha sẵn chứa 1%axít axeticgồm methanol, acetonitril và H2O với tỉ lệ % thể tích lần lượt là 40%, 15%, 45%). Theo điều kiện đó, rửa giải đẳng dòng kết hợp phương pháp chuẩn ngoại và thêm chất chuẩn quercetin vào mẫu thử, chúng tôi đã xác định được quercetin tự do trong dịch chiết nụ hoa hòe có thời gian lưu tr=8,84 ± 0,04 (phút). Độ ổn định của hệ thống đã được đánh giá thông qua độ lệch chuẩn tương đối (RSD,%) của thời gian lưu, diện tích, chiều cao và hệ số kéo đuôi của đỉnh quercetin tự do trong dịch chiết hoa hòe. Kết quả cho thấy giá trị RSD đều nhỏ hơn 1%, chứng tỏ phương pháp HPLC thiết lập được có độ đặc hiệu, độ lặp lại và độ chính xác cao. Kết quả này tạo tiền đề cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm kết hợp phương pháp hóa lý và sinh học trong nghiên cứu về hoạt chất quercetin.
